組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

?

實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。檢測(cè)步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
雞H5型禽流感病毒（H5N1）抗體（IgG）elisa試劑盒Anti-LCA5研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué)

小鼠羧化不全骨鈣素（ucOC）elisa試劑盒Anti-LCA5L研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 干細(xì)胞 細(xì)胞類型標(biāo)志物 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物

D-Hanks緩沖液價(jià)格Anti-LSAMP研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 細(xì)胞膜受體 淋巴細(xì)胞 t-淋巴細(xì)胞 b-淋巴細(xì)胞

豬腦鈉素Elisa Kit圖片Anti-LRFN2/SALM1研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號(hào) G蛋白偶聯(lián)受體 表觀遺傳學(xué) G蛋白信號(hào)

人膀胱上皮細(xì)胞價(jià)格Anti-LRFN4研究領(lǐng)域  心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué)

Dulbecco磷酸鹽緩沖液（DPBS）（含鈣鎂，不含酚紅）說明書Anti-Laminin alpha 4研究領(lǐng)域

人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10（FGF10）elisa試劑盒Anti-Laminin alpha 4研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 干細(xì)胞 細(xì)胞表面分子

牛肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶-II（CPT-II）elisa試劑盒Anti-LAPTM4A研究領(lǐng)域

MEM（含非必需氨基酸、Earle平衡鹽、L-谷氨酰胺）報(bào)價(jià)Anti-LMBR1/DIF14研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體 淋巴細(xì)胞

大鼠椎間盤髓核細(xì)胞報(bào)價(jià)Anti-LACTB2研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體 淋巴細(xì)胞

甲叉雙丙烯酰胺使用說明書Anti-LRFN3/SALM4研究領(lǐng)域

常用PCR引物100uL多少錢Anti-Lamin B2研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體 淋巴細(xì)胞

小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基價(jià)格Anti-Lubricin/SZP研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞表面分子 淋巴細(xì)胞 t-淋巴細(xì)胞 b-淋巴細(xì)胞

三聚氰胺ELISA快速檢測(cè)試劑盒Anti-LHX2研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞表面分子 細(xì)胞類型標(biāo)志物 自然殺傷細(xì)胞 淋巴細(xì)胞 t-淋巴細(xì)胞 b-淋巴細(xì)胞

U251（人膠質(zhì)瘤細(xì)胞）說明書Anti-LRRTM1研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長(zhǎng)因子和激素 新陳代謝 線粒體

槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷Integrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e)  粘附分子整合素α5抗原TRAF4/CART 1  腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白4抗體

香葉木素-7-O-β-D-葡萄糖苷Integrin alpha V/CD51 peptide  整合素αV抗原TRAF3/CD40bp  腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體

仙苷; 異鼠李素-3-O-β-D-蕓香糖苷J(rèn)AK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1)  蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗原TRAF1  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體

芍藥內(nèi)酯苷JAK2(Tyrosine-protein kinase JAK2; Janus kinase 2; JAK-2)  蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-2抗原TRADD  腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體

素phospho JAK2(phospho-Tyr1007+Tyr1008)  磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗原TRAC1/RNF125  環(huán)指蛋白125抗體

白蠟樹素；涔皮素JNK1/3 (c-Jun ami-terminal kinase 1/3)  c-Jun氨基末端激酶1/3多肽抗原TRA16  激素受體相關(guān)蛋白16抗體

環(huán)氧澤瀉烯phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide  磷酸化氨基末端激酶1/2/3（pJNK1/2/3）抗原TRA16  激素孤兒受體相關(guān)蛋白抗體

N-甲基野靛堿Ki-67(Antigen identified by moclonal antibody Ki 67)  Ki-67 AntigenTPX2  微管相關(guān)同源蛋白TPX2抗體

硫酸金雀花堿Klf4 (Kruppel likefactor 4)  腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子抗原TPTE  腫瘤/抗原44抗體

百蕊草素I；山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷；阿福豆苷phospho-KLF5/Krueppel-like factor 5 (pSer272)  磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原TPST2  酪蛋白硫酸轉(zhuǎn)移酶2抗體
貓血支原體PCR檢測(cè)試劑盒說明書人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃100毫升

人α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：100支/包

人α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT50支/包

人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃250毫克

人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：避光，-20℃10克

人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT，避光250克

人α半乳糖基抗體(Gal)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃25毫升