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      產(chǎn)品中心

      Product Center

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      雷氏普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒廠家

      產(chǎn)品簡介

      雷氏普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒廠家
      上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
      TUBB檢測試劑盒板內(nèi)板間差異小,精密度高。實驗重復(fù)誤差小,穩(wěn)定性好

      更新時間:2021-03-13
      訪問次數(shù):518
      詳細(xì)介紹在線留言

      組成及試劑配制:
      1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
      2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
      3、 樣品稀釋液:1×20ml。
      4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
      5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
      注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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       產(chǎn)品名稱

       雷氏普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒廠家

       英文名稱

       Providencia rettgeriPCR

       貨號

       LZP7194

      實驗過程:
      一、試劑準(zhǔn)備
      1. DNA模板
      2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
      ddH2O至               50 μl
      PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
      4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
      三、注意事項
      1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
      2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
      3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
      4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
      5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
      6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
      7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
      一、 試劑的準(zhǔn)備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
      試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
      熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應(yīng)條件
      將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
      推薦循環(huán)條件:
      1循環(huán) 50℃ for 2 min
      預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
      PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
      Aluminium-nickelL-高絲氨酸 98%4,4'-二(9-咔唑)聯(lián)苯 98%

      Devarda's alloyD-組氨酸 99%2,5-二(氯甲基)- 1-甲氧基-4- (2-乙基已氧基)-苯 98%

      Wood’s metalL-高苯氨酸 98%2-溴-9-芴酮 96%

       Gold tribromideDL-組氨酸鹽酸鹽 BR9,9-二辛基-2,7-二溴基芴 97%

      Gold oxideDL-高苯氨酸 98%9,9-二己基-2,7-二溴芴 97%

      PPODL-異亮氨酸 98%3-癸基噻吩 98%

      POPOPD-異亮氨酸 98%9,9-二甲基-2,7-二溴芴 98%

      ImidazoleD-別異亮氨酸 98%2,7-二溴芴 98%

      1-MethylimidazoleDL-亮氨酸 98%2,6-二甲基-γ-吡喃酮 99%

      Levamisole hydrochlorideL-叔亮氨酸 99%2,7-二溴芴酮 96%

      AECDL-賴氨酸 99%2,6-二甲基-4H-4-亞吡喃基二 98%

      2-AmibenzimidazoleD-亮氨酸 99%3-己基噻吩 98%

      2-AmibenzothiazoleD-蛋氨酸 99%2-甲氧基-5-(2′-乙基已氧基)對苯二甲 98%

      2-AmithiazoleL-正纈氨酸 99%N,N′-二苯基-N,N′-(1-萘基)-1,1′-聯(lián)苯-4,4′-二胺(NPD) 99.

      BenzimidazoleL-正亮氨酸 99%3-辛基噻吩 98%

      Butyl-PBDD-鳥氨酸鹽酸鹽 99%6,13-五并苯醌 99%

      奧美沙坦酯 Lmx1B (D1E2) Rabbit mAbRabbit anti-Bovine IgM whole serum  兔抗牛IgM抗血清

      四氫生物蝶呤;沙蝶呤;(6R)-BH4CHD1L (E1I8C) Rabbit mAbRabbit Anti-Bovine IgM  兔抗牛IgM

      安倍生坦Phospho-Akt1 (Ser129) (D4P7F) Rabbit mAbRabbit anti-Bovine IgG whole serum  兔抗牛IgG抗血清

      安倍生坦(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-Aurora A (Thr288)/Aurora B (Thr232)/Aurora C (Thr198) (D13A11) XP® Rabbit mAb  (Alexa Fluor® 555 Conjugate)Rabbit Anti-Bov IgG/RBITC  羅丹明標(biāo)記的兔抗牛IgG

      鹽酸決奈達隆XPF (D3G8C) Rabbit mAbRabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗牛IgG

      決奈達隆(標(biāo)準(zhǔn)品)Sec31A (D1G7I) Rabbit mAbRabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗牛IgG

      雷諾Atg13 (E1Y9V) Rabbit mAbRabbit Anti-Bov IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗牛IgG

      雷諾(標(biāo)準(zhǔn)品)Atg13 (E1Y9V) Rabbit mAbRabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗牛IgG

      樂卡地平鹽酸鹽NCAPD3 (D3H6L) Rabbit mAbRabbit Anti-Bov IgG/PE  PE標(biāo)記的兔抗牛IgG

      樂卡地平鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)PTMScan® Asymmetric Di-Methyl Arginine Motif [adme-R] KitRabbit Anti-Bov IgG/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗牛IgG
      雷氏普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒廠家人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型(AgtrⅠa)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

      人血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT25克

      人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

      人血管緊張肽酶A(ATA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100張/盒

      人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10克

      人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

      人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500毫克

      人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

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